層析硅膠制備板爬大板的技巧總結(jié)
可以分的樣品：1.要對弱酸比較穩(wěn)定，因為硅膠板是弱酸性的，雖然可以堿化；對空氣，水，有機溶劑穩(wěn)定；2. 在常規(guī)的，低沸點的溶劑里要好溶，溶不掉的另想辦法。3.最好有紫外，紫外不顯色的，因為在制備板上你用其他方法顯色一般都會破壞樣品，所以沒紫外的最好換方法。
大板的容量。一般一塊板上樣量在100 mg以下（粗產(chǎn)品），當(dāng)然如果不好分，上樣量要小一些，但最好不要少于15mg，否則難回收。東西多可以多上幾塊板，1g以上的還是過柱子吧。前邊那位說進口板只分8mg，太少了點，分出來的東西大概只能夠打個核磁。
其次上樣：用盡可能少的溶劑溶解你的樣品。不好溶解的樣品，尤其是在展開劑里不好溶的樣品會趴在上樣線那里爬不上去。必要時可以加DMF,DMSO助溶，但上樣后最好先用石油醚等小極性的溶劑先爬一遍，否則DMF，DMSO會把你的樣帶上去花掉。我們上樣是用塑料滴管前邊剪掉一點，揪一點脫脂棉捻個細(xì)條塞緊滴管里，然后就可以吸取樣品溶液。上樣前先在板上離板子邊緣1.5厘米左右的地方用鉛筆畫條線，上樣時就沿著這條線均勻的把樣品溶液涂上去，勁量直一些窄一些。溶劑較多一次上不完的，把先上好的溶液吹干再接著上第二批，如此上完后，用滴管吸點干凈溶劑再上一下，把棉花上粘的樣都上到板上去。樣品上好后，要把溶劑盡量吹干。用電吹風(fēng)吹的時候要小心別正對著使勁用高熱風(fēng)吹，小心把樣吹壞了。
展開劑的選擇：常用的2種體系：乙酸乙酯/石油醚，甲醇/二氯甲烷，后者一般用于極性大的。展開劑的極性就是你爬小板把要的點爬到rf 02,0.3左右的極性。有時候可以用三組分的展開劑，如乙酸乙酯/石油醚/二氯甲烷或乙酸乙酯/甲醇/二氯甲烷之類，但不要加THF,DSMO,DMF之類大極性高沸點的溶劑。難分的樣，展開劑的極性要小，一遍爬不開，可以多爬幾遍。一般一個展缸配一百毫升展開劑，可以同時爬3塊板，爬一次大概一個小時，甲醇/二氯甲烷體系會快一些。酸性的化合物，展開劑里可以滴一兩滴乙酸，堿性的化合物，可以滴一點三乙胺或氨水。
板爬好了就在紫外燈下找到你要的那條帶，用鉛筆畫出來。要是不確定是哪條帶，可以把疑似帶刮下一小點放樣品管里，用甲醇乙腈之類的溶一下，濾膜過濾，濾液去打個LCMS。確定要的帶，用小刀或刮刀把整條帶上的硅膠都刮下來刮到大稱量紙上，記得一定要戴口罩！把刮下來的硅膠用稱量紙包起來碾碎（我一般就用小展缸的底）。把硅膠倒在三角瓶里，扔個磁子進去，加進去樣品的良溶劑（我們一般用1:10 的甲醇/二氯甲烷），放攪拌器上攪個半小時，過濾，濾液旋干就OK了。注意：用甲醇乙腈等極性強的溶劑會把硅膠也溶出來，你旋干了稱重有可能比你分之前的量還多，核磁上會有點不干凈，LCMS上紫外沒吸收，但也可能會在進樣峰那里有個包不好看。
另外，題主說爬板子被一些大牛認(rèn)為是投機取巧、偷懶的分離方法。在絕大部分paper上都不會說自己用了爬大板這種分離方法。這絕對是只在學(xué)校里混，沒去過公司才的人會說的話！在公司里，實際實驗中用到爬大板來分離有機物的機會太多了！做藥物篩選的，一開始只會要5-25mg的樣，所以微量反應(yīng)是很多的。而大板是最便宜最快捷的分離方法，比起硅膠柱要裝硅膠，拌樣，上柱簡單得多，100mg以下的小樣，過硅膠柱分沒了的事情經(jīng)常有，而爬大板，所有的東西都在大板上，即使沒分好，還可以刮下來回收不會丟。比起制備色譜便宜很多，又不用排隊，反相柱分出的水和乙腈溶液又很難旋干。最后分離的純度一般也是有保證的，很多次我爬一次大板LC純度就在95%以上了直接交貨。所以，大膽的用吧，發(fā)論文寫PTLC也不掉價的！
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